列舉一些GIBCO澳洲胎牛血清使用過程的注意事項
瀏覽次數(shù):1477發(fā)布日期:2021-12-22
GIBCO澳洲胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質(zhì)對促進細(xì)胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
GIBCO澳洲胎牛血清的實驗原理:基因表達的半定量PCR檢測,真核細(xì)胞含有三類基本RNA:核糖體RNA(rRNA)、信使RNA(mRNA)、轉(zhuǎn)移RNA(tRNA)。其中mRNA傳遞合成蛋白質(zhì)的全部遺傳信息,是蛋白質(zhì)生物合成的中間環(huán)節(jié),具有特殊意義。Trizol試劑可從細(xì)胞中快速提取細(xì)胞總RNA,將其中的mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,以一對特異性引物對目的cDNA進行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增。由于每個循環(huán)中合成的引物延伸產(chǎn)物可作為下一循環(huán)中的模板,因而每次循環(huán)中靶DNA的拷貝數(shù)呈幾何級數(shù)增長,因此,30次PCR循環(huán)將產(chǎn)生約1億倍(230)的擴增片段。PCR技術(shù)又稱聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù),是一種在體外(試管)擴增核酸的技術(shù)。
GIBCO澳洲胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)的“座上賓”備受關(guān)注,它為細(xì)胞生長提供必要的營養(yǎng)物質(zhì)。如此重要我們就更應(yīng)該關(guān)注在使用過程的注意事項,今天我們就注意列舉。
1、注意避免沉淀加入培養(yǎng)液
添加的時候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因為如果培養(yǎng)液有沉淀的存在,會使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點,除此之外,細(xì)胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會極其不利于細(xì)胞的正常生長。那么為了盡可能減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。
2、注意解凍的方法
再高質(zhì)量的也要在使用的時候堅持謹(jǐn)慎的原則,因此在解凍血清的時候,要細(xì)心地考慮到其解凍時體積一般會增大的特點,事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外最好采用國際通用的解方式解凍血清。
3、注意血清的滅活方法
GIBCO澳洲胎牛血清的滅活,一般是用水浴加熱的方式來加熱已經(jīng)*解凍的血清,那么需要注意的是,加熱的過程中一定要規(guī)則地將血清搖晃均勻。而之所以這么做,是為了能夠讓血清中的補體成分去活化。不過胎牛血清的滅活并不是強制的要求,客戶可以自行選擇是否進行滅火處理。
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