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qiagen 12145質(zhì)粒提取試劑盒Plasmid Midi Kit

  • 更新時(shí)間:  2023-07-26
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  • 簡(jiǎn)單描述
  • qiagen 12145質(zhì)粒提取試劑盒Plasmid Midi Kit
    QIAGEN Plasmid Kits應(yīng)用重力流陰離子交換柱純化轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒DNA。該試劑盒可純化獲得至多10 mg的質(zhì)粒DNA。離心獲得澄清的裂解產(chǎn)物和異丙醇沉淀。
詳細(xì)介紹

qiagen 12145質(zhì)粒提取試劑盒Plasmid Midi Kit

轉(zhuǎn)染效率與質(zhì)粒純化方法。

采用不同方法制備pRSVcat DNA,通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染將其導(dǎo)入的細(xì)胞系內(nèi),40小時(shí)后測(cè)定CAT表達(dá)水平,確定轉(zhuǎn)染效率。每個(gè)柱形代表4個(gè)獨(dú)立的轉(zhuǎn)錄的平均值(2個(gè)質(zhì)粒制備物分別轉(zhuǎn)染2次)。使用QIAGEN Plasmid Kit可獲得zui高的轉(zhuǎn)染效率。

qiagen 12145質(zhì)粒提取試劑盒Plasmid Midi Kit

Performance

QIAGEN Plasmid Kit利用重力流QIAGEN陰離子交換柱技術(shù)高效純化質(zhì)粒DNA。產(chǎn)量可達(dá)10 mg(Giga)、2.5 mg(Mega)、500 µg(Maxi)、或100 µg(Midi)高拷貝質(zhì)粒DNA(培養(yǎng)體積取決于質(zhì)粒拷貝數(shù)、插入片段大小、宿主菌株和培養(yǎng)基。)QIAGEN Plasmid Kits純化的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用,如:轉(zhuǎn)染(參見(jiàn)"Transfection efficiency versus plasmid purification method")、克隆和體外轉(zhuǎn)錄。

Principle

QIAGEN-tips內(nèi)*的陰離子交換樹(shù)脂專為純化核酸設(shè)計(jì)。它*的分離特性,使純化的DNA的純度相當(dāng)于連續(xù)2次CsCl梯度離心得到的DNA純度。預(yù)裝的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,縮短了純化質(zhì)粒的手動(dòng)操作時(shí)間。整套QIAGEN質(zhì)粒純化體系避免苯酚、lvfang、溴化乙錠和CsCl等有毒物質(zhì),減小對(duì)使用者和環(huán)境的危害。

Procedure

使用QIAGEN Plasmid Kits,細(xì)菌裂解物通過(guò)離心澄清。澄清后的裂解物上樣到陰離子交換柱,質(zhì)粒DNA在適當(dāng)?shù)牡望}條件和pH條件下與樹(shù)脂進(jìn)行選擇性結(jié)合。RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物和和其它低分子量雜質(zhì)用中鹽洗滌液去除,用高鹽緩沖液洗脫純質(zhì)粒DNA(參見(jiàn)"QIAGEN Plasmid Kit procedures")。得到的DNA用異丙醇沉淀濃縮和脫鹽后,離心收集。

Applications

QIAGEN Plasmid Kits純化質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用,如:

轉(zhuǎn)染

克隆

PCR

體外轉(zhuǎn)錄

應(yīng)用Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc.
起始樣本體積2.5–5 liters culture volume
質(zhì)粒類型High-copy, low-copy, cosmid DNA
處理Manual (centrifugation)
每次處理樣本量;通量1 sample per run
技術(shù)Anion-exchange technology
每次運(yùn)行時(shí)間或處理樣本數(shù)320 min
產(chǎn)量<10 mg

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